环形聚合酶延伸法(circular polymerase extension cloning; CPEC),理学-生物学-生物工程-生物技术-生物技术-合成基因组学-模块,直接将末端重叠的多个片段和载体一步连接成完整的环状质粒的方法。具有重叠序列的寡核苷酸片段经变性、退火后形成互补双链,然后在嗜热性DNA 聚合酶的作用下进行延伸,获得连接产物。王开胜等从野油菜黄单胞杆菌中利用聚合酶链反应(PCR)克隆得到删除信号肽的纤维素酶基因engXCA信号肽,并成功使用环形聚合酶延伸法构建了原核表达载体pET28a-engXCA;将该载体转入大肠杆菌rosetta(DE3)中,用异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导蛋白质的表达;通过Ni-NTA树脂非变性亲和纯化,得到了纯度较高的蛋白质。