分子量测定(molecular mass determination),医学-现代医学-药学领域-〔生物技术与生物制品鉴定〕-治疗用生物制品检定-生物技术药检定-生物技术药检定方法,依据不同的原理,通过相应检测方法测定重组蛋白药物的分子量,并将测定结果与理论值进行比较,以对重组蛋白药物进行质量控制或分析鉴定。常用方法有十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳法(SDS-PAGE电泳法)、质谱法及高效分子排阻色谱法(HPSEC法)。另外还有黏度法、超速离心沉降法、光散射法等,但应用较少。SDS-PAGE电泳法应用最为广泛。首先用还原剂及变性剂对重组蛋白进行处理,使其分子结构充分伸展并带有相同密度的负电荷。处理后的蛋白分子在电场的作用下于聚丙烯酰胺凝胶中泳动,其迁移率(单位时间泳动的距离)与分子量的对数呈线性关系,即:lgMW=K-bX式中,MW为分子量;X为迁移率;k、b均为常数。通过将已知分子量的蛋白质标准的迁移率对分子量对数作图,可获得一条标准曲线,根据待测蛋白的迁移率即可在标准曲线上求得其分子量。