桥粒芯,克隆人桥粒芯胶蛋白3前导肽(Dc3p)基因,并进行表达、纯化和鉴定,标本必须为液体,不含沉淀。包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等。方法:用PCR法从桥粒芯胶蛋白(Dc)cDNA文库中扩增出Dc3p基因,与pGEX-4T-2载体连接成重组表达质粒pGEX-4T-2/Dc3p;重组质粒转入B121大肠杆菌:经诱导表达谷胱甘肽S-转移酶-Dc3p(GST-De3p)融合蛋白,该蛋白经GlutathioneSepharose4B亲和层析柱纯化,SDS-PAGE和免疫印迹法检测鉴定。结果:经酶切及序列分析鉴定,重组质粒pGEX-4T-2/De3p成功构建,诱导后高表达GST-De3p融合蛋白并得到纯化,免疫印迹法证实表达蛋白为Gsr-Dc3p。结论:获得高表达、高纯度的GST-Dc3p融合蛋白,为De3p的功能及免疫学分析打下基础。