错配聚合酶链反应(error-prone PCR; epPCR),理学-生物学-生物工程-生物技术-生物技术-基因组工程-连接酶链式反应,通过改变反应条件或利用低保真度的DNA聚合酶,增加合成过程中的碱基错配率,致使扩增DNA序列出现多点突变的体外诱变技术。又称易错PCR、倾向错误PCR。原理碱基互变异构体、保真性DNA聚合酶和反应条件的改变为错配提供了可能。DNA碱基中的鸟嘌呤(G)、胞嘧啶(C)和胸腺嘧啶(T)均为含氧碱基,有酮式和烯醇式两种互变异构体存在,而腺嘌呤(A)为含氮碱基,有胺式和亚胺式两种互变异构体存在。G、C和T主要以酮式结构存在,而A含氮碱基中的氮原子主要以胺式状态存在,不同同分异构体间氢原子位置的不同,以及相同位置电子云偏离方向的不同,致使碱基配对形式发生改变,例如当T以酮式结构存在时,与A配对,当以烯醇式结构存在时,则与G配对。几乎所有DNA聚合酶催化DNA复制过程中都会出现碱基错配。已知错配率最高的Taq DNA聚合酶,是耐热DNA聚合酶中活性最高的,由于仅具有5′-3′外切酶活性,故对合成中某些单核苷酸的错配不能校正,进而增加错配概率。