二硫键修饰(disulfide bond modification),理学-生物学-生物工程-酶工程-酶工程-酶分子修饰-侧链修饰,通过二硫键对蛋白质进行修饰的方法。同巯基(—SH)类似,二硫键(—S—S—)具有其特性,可用于进行特异性修饰。通常采用还原的方法,这些方法经常与某些巯基修饰方法结合,以阻止再氧化成二硫键或计算断裂开的二硫键数目。二硫键被还原之后得到具有高反应活性的巯基,可以用于聚乙二醇(PEG)的定点修饰,然后通过重建三碳桥的方法替代二硫键对蛋白质结构的作用。实验证明,通过二硫键对蛋白质进行定点修饰的方法具有反应效率高、产物易于分离、蛋白质的生物活性满足临床使用等优点,具有广泛的应用前景。对蛋白质中含有的二硫键进行PEG定点修饰分为两个步骤:第一步利用温和的还原剂使二硫键还原释放出两个硫氢基;第二步通过PEG修饰剂的双烷基化反应将还原后的二硫键的两个巯基分别烷基化形成三碳桥,PEG通过三碳桥与蛋白质共价偶联。三碳桥能够在一定程度上替代二硫键,从而完成PEG的定点修饰。