酚氯仿提取法(phenol chloroform extraction),工学-公安技术-刑事科学技术,利用酚、氯仿从生物检材中提取、纯化DNA的方法。在刑事案件现场发现人体有核细胞,利用SDS(十二烷基硫酸钠)将细胞膜裂解,在蛋白酶K、EDTA(乙二胺四乙酸)和去污剂的存在下消化蛋白质成多肽或小肽分子,然后用等体积饱和酚抽提除去蛋白质,酚-氯仿抽提去除未消化的蛋白质,再用氯仿抽提去除DNA溶液中的酚,最后用2.5倍体积的无水乙醇在0.3摩/升NaCl存在下沉淀DNA,浓缩回收DNA,70%醇洗去DNA沉淀中的盐,真空干燥后用TE溶解DNA。有机法能获得较多的大片段DNA,比Chelex-100提取法能更彻底地纯化DNA。有机溶剂(酚/氯仿)祛除混杂其中的蛋白质,酚的作用是抽提细胞DNA时使蛋白质变性,同时抑制了DNA酶的降解作用,用苯酚处理匀浆液时,由于蛋白与DNA联结键已断,蛋白分子表面又含有很多极性基团与苯酚相似相溶。蛋白分子溶于酚相,而DNA溶于水相。氯仿的作用是克服酚的缺点;加速有机相与液相分层。利用乙醇等非DNA相容性溶剂使DNA沉淀,从而得以分离提取。