蛋白质冻融(protein freezing and thawing),理学-生物学-生物工程-生化工程-生化工程-生化剂型工程,为了使蛋白质在较长时间内保持稳定,将其冷冻保存,然后在使用前进行融化的过程。可溶性蛋白质通过亲水氨基酸残基与极性水分子氢键结合,水溶液中水分子之间也是通过氢键相互作用形成聚合水分子形式而存在的,这就为可溶性蛋白质在水溶液中自由折叠为初步的天然形式提供了骨架。冷冻过程中,水由液到固的变化,导致这个骨架中形成冰晶,在融化过程中,冰晶重新形成水分子。蛋白质的活性是和它的空间构象相关的,在冻结、融解过程中,肯定会引起氢键、疏水键的强弱变化,从而引起蛋白质的空间构象的变化,而构象一旦变化,即使能恢复(因为没有变性),但很难做到100%的恢复成原来的构象。在蛋白质溶液冻融的过程中,影响蛋白活性的因素包括:①蛋白质的浓度。增加蛋白质浓度可提升蛋白质的稳定性,但同时高浓度也会导致蛋白质聚集。②缓冲溶液的种类。③缓冲溶液的pH值。④冻融的速度。⑤冻融循环次数等。在没有保护剂的情况下,冻结过程中的蛋白质变性主要是由表面变性引起的,与暴露于冰水界面有关。