葡萄牙的玛丽亚·曼努埃拉公主（Maria Manuela；1527年10月15日-1545年7月12日），是葡萄牙国王若昂三世和他的妻子奥地利的卡塔琳娜的长女和第二个孩子。她是阿斯图里亚斯亲王妃和米兰公爵夫人，未来的西班牙国王费利佩二世的第一任妻子。玛丽亚·曼努埃拉于1527年10月15日出生在科英布拉，是葡萄牙国王若昂三世和他的妻子奥地利的卡塔琳娜的长女和第二个孩子，在她的七个弟弟妹妹中，只有1537年出生的若昂·曼努埃尔幸存下来。她的教育在很大程度上受到她母亲对圣事的虔诚的影响，再加上对她抱有很高的期望，因为作为葡萄牙国王的唯一女儿，她的婚姻值得给予最高的考虑。年轻时接受过人文教育，被认为是她那个时代的一位公主的典型教育。卡塔琳娜王后说服她的父亲接受查理五世的继承人，即未来的费利佩二世，与玛丽亚·曼努埃拉结婚。