钳制聚合酶链反应(PCR clamping),理学-生物学-生物工程-生物技术-生物技术-合成基因组学-模块,利用肽核酸(peptide nucleic acid; PNA)可以与互补单链核酸高特异性结合的特性而开发出的灵敏、特异的聚合酶链反应(PCR)。原理PNA均为核酸类似物,可以高度亲和并特异性地与DNA或RNA结合。PNA可以与单链核酸模板结合,且较普通核酸强,解链温度比普通DNA双链高50%,但如果出现错配,则结合力下降,解链温度会明显低于相应DNA双链的解链温度。检测基因中是否存在突变时,采用两条竞争性引物,一条是与野生型互补的PNA引物,一条是与突变型互补的DNA引物。当基因未发生突变时,PNA引物与靶序列结合的能力高于DNA引物,而在PNA结合靶序列后,由于PNA不能通过DNA聚合酶延伸,从而不能引起片段的扩增;当基因中存在突变时,DNA引物与靶序列的结合强度高于PNA引物,产生扩增片段。PNA引物也可以位于突变引物的下游或者扩增片段的内部,当PNA与靶位点结合后,也能阻止扩增反应的进行。