DNA洗牌技术(DNA shuffling),理学-生物学-微生物学-微生物遗传学,对一组进化上相关的DNA序列进行重新组合而创造新基因的一种手段。分子定向进化的一种技术。又称DNA混编、DNA改组。随着PCR技术的发展和应用,1994年美国的W.P.C.施特默尔[注]提出了一个全新的人工分子进化技术——DNA洗牌技术。该技术的基本原理是先将来源不同但功能相同的一组同源基因,用DNA核酸酶I(DNaseI)进行消化,产生随机小片段,由这些随机小片段组成一个文库,使之互为引物和模板,进行PCR扩增。当一个基因拷贝片段作为另一基因拷贝的引物时,引起模板转换,重组因而发生。导入体内后,选择正突变体,即用预定的功能标记来筛选所期望的基因或DNA作新一轮的体外重组。一般通过2~3次循环,可获得产物大幅度提高的重组突变体。基本步骤如图所示:①用DNaseI消化功能相同的一组基因片段(A),从而产生随机小片段(B)。②经提纯后,用无引物(经变性后可互为引物)的类似PCR反应将这些小片段重新装配成完整长度的重组基因片段(C),在装配过程中被证明有低水平点突变产生。