聚酰胺(Polyamide)是通过酰胺基聚合而成的一类高分子化合物, 层析分离中常用的聚酰胺是由己内酰胺聚合而成的尼龙6和由己二酸和己二胺聚合而成的尼龙66。聚酰胺分子中含有丰富的酰胺基团, 可与酚类、醌类、硝基化合物等形成氢键而被吸附, 与不能形成氢键的化合物分离。所以, 利用聚酰胺作为层析柱填料, 可使一定极性范围的某类物质得以分离精制。对于黄酮类和多酚类化合物, 因为其富含酚羟基, 可通过分子中的酚羟基与聚酰胺分子中的酰胺基形成氢键缔合产生吸附。吸附的强度主要取决于这两种化合物中羟基的数目与位置、以及溶剂与化合物或溶剂与聚酰胺之间形成氢键的缔合能力大小。溶剂分子与聚酰胺或黄酮类化合物形成氢键缔合的能力越强, 则聚酰胺对这两种化合物的吸附作用将越弱。聚酰胺层析柱即是利用此性质对各种植物中黄酮、茶多酚等进行吸附、洗脱而分离的, 即所谓的“氢键吸附”学说。对聚酰胺层析的分离机理, 除了“氢键吸附”学说外还有“双重层析”理论。前者不能解释当以氯仿-甲醇为洗脱液时, 为何黄酮甙元比黄酮甙先洗脱下来。