双向电泳(two-dimensional electrophoresis,2-DE)是等电聚焦电泳和SDS-PAGE的组合，即先进行等电聚焦电泳(按照pI分离)，然后再进行SDS-PAGE(按照分子大小)，经染色得到的电泳图是个二维分布的蛋白质图。蛋白质组研究的发展以双向电泳技术作为核心. 双向电泳由O'Farrell's于1975年首次建立并成功地分离约1 000个E.coli蛋白，并表明蛋白质谱不是稳定的，而是随环境而变化. 双向电泳原理简明，第一项进行等电聚焦，蛋白质沿pH梯度分离，至各自的等电点;随后，再沿垂直的方向进行分子量的分离。目前，随着技术的飞速发展，已能分离出10 000个斑