阿替普酶活性测定

阿替普酶活性测定（activity assay of alteplase），医学-现代医学-药学领域-〔生物技术与生物制品鉴定〕-治疗用生物制品检定-生物技术药检定-重组酶类药物检定-阿替普酶检定，阿替普酶的酶活性通常采用气泡上升法测定。阿替普酶能激活人血纤维蛋白溶酶原形成人血纤维蛋白溶酶。该酶可以将凝血酶和人纤维蛋白原形成的纤维蛋白凝块溶解，使固定在凝块中的气泡上升，当小气泡上升至反应溶液表面时作为反应终点，以阿替普酶对照品浓度的对数为横坐标，以反应终点时间的对数为纵坐标做标准曲线，根据标准曲线计算样品活性。阿替普酶的酶活性测定要点包括：①溶液制备。取二水合磷酸二氢钠1.79克、磷酸氢二钠7.10克、叠氮化钠0.20克以及0.1克的吐温80，加水至1000毫升，制成磷酸盐缓冲液。取人凝血酶，加磷酸盐缓冲液制成每毫升含33.3单位的人凝血酶溶液。取人纤维蛋白原，加磷酸盐缓冲液制成每毫升含可凝蛋白2毫克人纤维蛋白原溶液。取人血纤维蛋白溶酶原，加磷酸盐缓冲液制成每毫升含1毫克的人血纤维蛋白溶酶原溶液。临用前取等体积的标准品溶液或供试品溶液与人凝血酶溶液，混匀，置冰浴中。②标准品溶液制备。