非玻璃化冻存(non-vitrified cryopreservation),工学-工程热物理及动力工程-工程热物理-传热传质学-生物传热-冷冻保存与复苏,生物体在冷冻过程中有冰晶生成的保存过程。常用的非玻璃化冻存方法是慢速冷却法,又称两步法。其具体步骤如下:先将细胞放在含有保护剂的溶液中进行预处理,接着用程序降温仪将上述细胞连同溶液以较慢的速度降温;细胞外溶液中的水分结冰使溶液的浓度升高,胞内的水分透过细胞膜向外渗出,细胞体积收缩,胞内液体浓度提高;随着温度的下降,上述过程继续进行;到一定的低温时,再快速降温至液氮温度,并长期保存在此温度下。两步法中,第一步冷却的目的是在保证不形成胞内冰、不使未冻水份额过低的前提下,逐步降温,提高未冻溶液中保护剂的浓度,达到玻璃化溶液的要求。第二步冷却的目的是利用较高的冷却速率,使高浓度保护剂溶液能实现非晶态固化。因此,非玻璃化冻存实际上是部分玻璃化冻存。在慢速冷冻过程中,不同的细胞要求不同的最佳降温速率。若降温速率过快,则在胞内形成冰晶,若降温速率过慢,则细胞收缩剧烈,并且细胞处在高浓度溶液中的时间过长也会引起损伤。