定点引物诱变(site-primer mutagenesis),理学-生物学-生物工程-酶工程-酶工程-酶分子改造-酶半理性设计-饱和突变,在引物序列上设计突变,通过聚合酶链反应(PCR)方法将突变引入目的基因的技术。利用携带突变位点的引物,结合常规PCR、交错延伸PCR、全质粒PCR等技术,可以获得点突变、饱和突变、插入、删除等突变类型。主要经过以下过程:①突变引物的合成。根据设计需要,在引物的不同位点引入突变碱基。②PCR。根据实验需要,可采用常规PCR、交错延伸PCR、全质粒PCR、大引物PCR等多种不同的PCR方法。③重组基因的转化。④筛选阳性克隆。定点引物诱变技术省时、省力,诱变成功率高且容易操作,已成为分子生物学基因突变的关键技术之一。通过定点引物诱变,可以对特定的氨基酸位点进行突变、删除、插入等操作,通过考察突变体的性质变化,来研究该位点在蛋白质整体结构功能中的作用,进而通过位点氨基酸种类的优化有效地改良蛋白质的性质。