乙醇沉淀法(ethanol precipitation),理学-生物学-生物工程-生化工程-生化工程-生化分离工程,通过添加适量乙醇使蛋白质分子从溶液中析出,从而实现蛋白质初级纯化的分离技术。乙醇能够有效地降低水的介电常数,破坏蛋白质分子的水化层,甚至能够破坏蛋白质的某些化学键(如氢键),导致蛋白质结构发生一定程度的变形,使蛋白质分子内部的疏水性基团暴露,从而引发疏水性聚集并析出沉淀。与盐析法不同,乙醇可以使不同蛋白质在相对比较狭窄的浓度范围内沉淀,从而可以有效地分离蛋白质混合物,分辨率较高,但有可能导致蛋白质变构、失活。在乙醇沉淀法中,蛋白质溶解度与乙醇浓度之间的关系无法用数学方程描述,因此,沉淀蛋白质的工艺参数只能通过实验确定。影响乙醇沉淀法的因素很多,包括乙醇用量、操作温度、操作时间、pH值以及离子强度等。为了保护蛋白质活性,一般需要在低温下进行沉淀操作,在保证均匀添加的基础上尽可能缩短操作时间。乙醇沉淀法具有诸多优点,包括产品纯度高、残留乙醇容易去除、实验重现性较好且容易放大等。