明胶培养基是在水浴锅中将NaCl-5g，蛋白胨-10g，牛肉膏-3g，明胶-120g，蒸馏水-1000mL这些成分溶化，不断搅拌。溶化后调pH 7.2~7.4，115°C 灭菌15min（温度过高明胶分子结构被破坏，不再凝固）。明胶液化( gelaune liquefaction)指细菌把明胶分解成液状的现象。这是因为有些细菌具有明胶酶(亦称类蛋白水解酶)，能将明胶先水解为多肽，又进一步水解为氨基酸，使其失去凝胶性质，从而使半固体的明胶培养基成为流动体，即液化。这种能力因细菌种类不同而有显著差异，因此很早以来就被作为鉴别、测定细菌的一种特征。例如:葡萄球菌属、变形菌属、芽孢杆菌属物具有液化能力，而大肠杆菌就无这种液该培养基中蛋白胨和牛肉膏粉为微生物生长提供氮源、维生素、矿物质；某些含明胶酶的细菌水解明胶，使其液化而降低明胶的胶凝作用。