两步消化法（two-step extraction procedure），工学-公安技术-刑事科学技术，对于含有精子的精液和非精液混合斑，为获得男性DNA分型，利用细胞结构的差异来分离精子细胞和非精子细胞的方法。又称差异裂解提取法。精子细胞膜和核膜含有大量的硫醇蛋白，具有丰富的二硫键。提取DNA时，第一步，向检材中只加入普通的消化液，因普通的消化液不能有效打开硫醇蛋白的二硫键，此时只有非精子细胞结构破坏，释放出非精子DNA。第一步消化结束的样本离心后分离固相和液相，沉淀的细胞即为精子细胞。第二步，在反应体系中除加入普通的消化液外，同时再加入化学试剂二硫苏糖醇（DTT）使精子细胞的二硫键还原，打开精子细胞，从而实现提取精子DNA的目的。