肽图测定

肽图测定（peptide mapping），医学-现代医学-药学领域-〔生物技术与生物制品鉴定〕-治疗用生物制品检定-生物技术药检定-生物技术药检定方法，通过蛋白酶或化学物质将重组蛋白裂解成肽段，再采用液相色谱或凝胶电泳将各肽段分离，不同肽段形成一系列的色谱峰或电泳条带，最后得到的图谱称为肽图。当蛋白的一级结构发生变化时，外源性DNA残留量测定肽图一般也会发生变化，因此可通过肽图测定评价不同批次生产的重组蛋白药物的结构一致性。常用方法包括胰蛋白酶裂解-反相高效液相色谱法与溴化氰裂解法。胰蛋白酶裂解-反相高效液相色谱法是重组蛋白药物质量控制中最常用的肽图测定方法。胰蛋白酶在适宜的条件下与待测蛋白反应，在精氨酸及赖氨酸的羧基端水解肽键，根据这两种氨基酸的多少及分布情况将蛋白质酶解成数量不等、大小不一的多肽，这些多肽通过液相色谱仪进行梯度洗脱，经紫外检测器记录即可得到该蛋白质的肽图。由于不同蛋白质理化特性的差异，肽图测定的酶解条件及液相色谱参数也不尽相同。